QCM Membrane Moodle

[Fatmas]

Bonsoir, le prof de biologie cellulaire nous a donné un questionnaire sur les mouvements moléculaires qui traitait de l'expérience de Fry et de Edidin au cours de laquelle on a fusionné une membrane cellule humaine et une membrane cellule de souris afin de prouver que les protéines pouvaient se déplacer. Ils ont utilisé des anticorps capables de reconnaître des protéines de souris et d'humain. A la fin de l'expérience, les protéines de souris et d'humains se sont mélangées, elles n'étaient du côté de la membrane leur correspondant. Or dans le questionnaire, on nous explique qu'on ne serait pas arrivé au même résultat si on avait utilisé un anticorps qui reconnait à la fois la protéine humaine et la protéine de souris. J'aimerais donc savoir pourquoi on n'arriverait pas au même résultat.

[Julia B]

Salut !
Si tu utilises le même anticorps qui reconnait à la fois les protéines humaines et les protéines de souris alors tu ne pourras pas savoir l'origine des protéines que tu regarde sur la membrane après l'expérience, puisqu'elles seront alors toutes marquées de la même couleur !

Imagine qu'on réalise une immunofluorescence directe : tu utilises un premier anticorps (marqué en rouge) qui reconnait spécifiquement les protéines de souris et un autre type d'anticorps (marqué en bleu) qui reconnait spécifiquement les protéines humaines. Alors après l'expérience tu pourras clairement dire que les marqueurs bleus correspondent aux protéines humaines et que les marqueurs rouges correspondent aux protéines de souris.
Par contre si tu utilises des anticorps qui reconnaissent les 2 types de protéines, alors ils se fixent aléatoirement sur les protéines humaines et les protéines de souris sans distinction et tu ne pourras différencier les 2 types de protéines ! Même si au départ ces anticorps étaient marqués pour certains en bleu et pour d'autres en rouge, ils se fixeront sur les protéines sans distinction de leur origine : donc des protéines humaines seront marquées en bleu et en rouge et idem pour les protéines de souris.
Pareil pour l'immunofluorescence indirecte dans laquelle l'anticorps secondaire se fixera donc sur tous les anticorps primaires (puisqu'ils sont tous identiques).

J'espère que c'est plus clair !

[Fatmas]

Salut !
Si tu utilises le même anticorps qui reconnait à la fois les protéines humaines et les protéines de souris alors tu ne pourras pas savoir l'origine des protéines que tu regarde sur la membrane après l'expérience, puisqu'elles seront alors toutes marquées de la même couleur !

Imagine qu'on réalise une immunofluorescence directe : tu utilises un premier anticorps (marqué en rouge) qui reconnait spécifiquement les protéines de souris et un autre type d'anticorps (marqué en bleu) qui reconnait spécifiquement les protéines humaines. Alors après l'expérience tu pourras clairement dire que les marqueurs bleus correspondent aux protéines humaines et que les marqueurs rouges correspondent aux protéines de souris.
Par contre si tu utilises des anticorps qui reconnaissent les 2 types de protéines, alors ils se fixent aléatoirement sur les protéines humaines et les protéines de souris sans distinction et tu ne pourras différencier les 2 types de protéines ! Même si au départ ces anticorps étaient marqués pour certains en bleu et pour d'autres en rouge, ils se fixeront sur les protéines sans distinction de leur origine : donc des protéines humaines seront marquées en bleu et en rouge et idem pour les protéines de souris.
Pareil pour l'immunofluorescence indirecte dans laquelle l'anticorps secondaire se fixera donc sur tous les anticorps primaires (puisqu'ils sont tous identiques).

J'espère que c'est plus clair !

Merci pour cette explication c'est beaucoup plus clair!