QCM 2 ANNALES UE2 2018

[Aya_Balis]

Bonjour!
Dans la qcm 2 de l'annale d'UE2 de 2018, l'item E dit que "GPR17 est phosphorylé"
La correction dit seulement que "GPR17 est N-glycosylé" sans en dire plus, est-ce que vous pourriez svp m'expliquer comment on en est arrivé à cette conclusion?

Voici le texte et les documents liés:

On dispose d’une lignée de cellules précurseurs d’oligodendrocytes, "P-Oli". La différentiation de ces
cellules peut être induite par un milieu de culture particulier appelé "CM". On réalise une première
expérience dans laquelle les cellules P-Oli sont incubées en présence de CM pendant des temps croissants
de 0 à 96 heures. On mesure l’expression de GPR17 par western blot réalisé sur l’extrait cellulaire total.
Parallèlement on mesure l’expression de la protéine MAG (Myelin-Associated Glycoprotein) qui est un
marqueur de la différentiation en oligodendrocyte. Les résultats sont présentés sur la Figure 1A. Les
résultats sont quantifiés sur la Figure 1B. Un western blot permettant de mesurer l’expression de l’actine
a été réalisé, le même signal a été observé pour chaque condition (données non montrées). Sur la Figure 1C
sont representés les résultats d’une expérience dans laquelle on mesure l’expression protéique de GPR17
dans les lysats de cellules P-Oli qui ont été traitées comme suit : ligne 1, cellules non différenciées ;
lignes 2 à 6, cellules différenciées, dont ligne 2 = cellules non traitées ; ligne 3 = cellules incubées en
présence d’endoglycosidase F à 0°C ; ligne 4 = cellules incubées en présence d’endoglycosidase F à 37°C ;
ligne 5 =cellules incubées en présence d’endoglycosidase H à 0°C ; ligne 6 =cellules incubées en présence
d’endoglycosidase H à 37°C.
NB : L’endoglycosidase coupe toutes les N-glycosylation des glycoprotéines.

[Vjera]

Bonjour,
On se base sur la figure C. Les Western Blot présentent l'expression de GPR17 dans les cellules différenciées et non différentielles et traiter ou non avec l'endoglycosidase a different temperature. L'énoncé précise que l’endoglycosidase coupe les N-glycosylation, si une protéine en présente une N-glycosylation, celle-ci sera coupée, et la protéine sera plus légère(donc migrera plus loin sur le western blot). On compare alors la ligne 2 (cellules différenciées de contrôle) et les lignes 3 et 4(cellules différenciées avec endoglycosidase a 2 températures différentes pour tester l'action de l'enzyme qui ont des températures spécifiques auxquelles elles fonctionnent le mieux). On voit en ligne 2 la présence de GPR17 a une bande, alors qu'en ligne 4, la GPR17 est présente aussi mais sur une bande plus basse. Elle a migré plus loin car elle est plus légère, résultant de l'action de l'endoglycosidase sur la partie N-glycosylé. C'est surtout le changement de poids moléculaire qui nous indique que la protéine avait un residus qu'elle n'a plus (donc elle est plus légère), sachant que l'endoglycosidase avec laquelle on a encuver en ligne 4 agit sur les résidu N-glycolyse, on en déduit et on peut donc conclure que la GPR17 est N-glycolyse.