darkblankspace a écrit : ↑13 novembre 2021, 08:03
Hello
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Ici je ne comprends pas pourquoi dans la correction on dit que ce sont des fragments de CHARGE voulue qui vont nous donner la taille des fragments d'ADN amplifiés après la PCR dans l'item E
Merci d'avance pour vos explications!
Salut,
Pour pouvoir déterminer la taille du fragment d'ADN amplifié après la PCR, on utilise le SDS-Page pour compter le nombre de nucléotides qui le constituent in fine.
De manière générale l'ADN est chargé négativement dans une solution aqueuse du fait de ses phosphates fortement chargés négativement à pH=7. Cependant la PCR ne se fait pas forcément dans un milieu aqueux!!!
De ce fait il faudrait connaître d'abord la nature chimique du solvant, puis déduire la charge globale portée par l'ADN amplifié, et lui ajouter des charges négatives supérieures au nombre de charges positives portées par l'ADN afin que l'électrophorèse puisse fonctionner. Sinon on ne verra rien du tout dans le gel puisque l'ADN chargée globalement positivement ne migrera pas et reste collé à la cathode.
J'espère que c'est plus clair désormais.
Bon courage.