Salut salut,
Oulala mais que vois-je comme horreur xD. Je vais lire et répondre au fur et à mesure comme d'habitude.
le.roi.singe a écrit : ↑25 novembre 2020, 17:37
la cytométrie en flux. Permet elle de déterminer la quantité d’ADN dans une cellule ? D'après un QCM oui, mais d'un autre coté, la cytométrie en flux ne permet pas de voir l’intérieur des cellules, c’est juste un outil de tri.
Ta cytométrie en flux c'est une cellule qui passe devant un laser et en fonction de si elle est fluo ou pas on applique une charge et on fait le tri pour garder celles qui réagissent... Bien donc maintenant si on met un intercalant de l'ADN, type DAPI, quand ça va passer devant le laser ça va briller bleu, cool cool cool... Bah trop cool même parce que tu vas capter cette lumière provenant de la cellule or si t'as une cellule avec un seul chromosome ça brillera beaucoup moins que si y'avait 4 chromosomes etc. Donc si ta cellule n'a qu'une quantité n d'ADN elle fluorescera bien moins que si elle avait fait une réplication d'ADN. Par conséquent tu peux quantifier l'ADN d'une cellule via la cytométrie en flux en mesurant la "quantité" de fluorescence.
le.roi.singe a écrit : La BrdU est un intercalant de l'ADN.
Non, pas du tout
, c'est un analogue que la thymidine (bromodésoxyuridine)
le.roi.singe a écrit : Il ne peut etre utilisé que pendant la phase S, lors de la réplication.
Oui car il va remplacer une thymidine dans la séquence d'ADN
le.roi.singe a écrit : Mais, dans les phases G1, G2, il y a aussi de l'ADN, non ? Pourquoi la BrdU ne fonctionne que lors de la phase S ?
Certes il y a de l'ADN, mais le BrdU n'est un pas un intercalant d'où le fait qu'il ne puisse être utilisé que pendant la phase S. Mais alors c'est quoi un intercalant de l'ADN ? Le DAPI par exemple, c'est une molécule qui va s'intercaler entre les brins d'ADN, au niveau des ponts, c'est ça un intercalant. Or ton BrdU il est intégré dans l'ADN et au lieu d'avoir des pont A-T et C-G tu as des ponts A-BrdU ou C-G.
Hayoto a écrit : Coucou ! Il me semble qu'on introduit la BrdU pendant la phase S car c'est la phase où les hélices d'ADN se déroulent, du coup c'est plus "facile" pour la BrdU de s'incruster. Voilà !
Y'a de l'idée mais c'est pas ça, bien tenté en tout cas, du coup j'espère que le passage au dessus t'aura aidé.
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(si j'ai les cours sous les yeux)
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